.

0 (hodnocen0 x )

(0.5) Půjčeno:2x 

BK

Praha : SNTL - Nakladatelství technické literatury, 1979

300 s.

000002561

I. Úvod ...11 // A. Struktura proteinů ...11 // B. Klasické čištění proteinů ...13 // C. Specifická modifikace klasických postupů ...19 // D. Afinitní chromatografie ...20 // Literatura ...21 // II. Základy afinitní chromatografie ...23 // A. Tuhý nosič ...23 // 1. Obecné principy ... 23 // 2. Různé nerozpustné nosiče ...24 // a) Celulosa ...25 // b) Polystyrénové gely ...26 // c) Příčně zesítěné dextrany ...26 // d) Polyakrylamidové gely ...26 // e) Pórovité sklo ...28 // f) Agarosa ...28 // B. Omezení způsobená matricí ...29 // 1. Vylučovací účinky matrice ...30 // 2. Oddalující molekuly a sterické vlivy ...34 // C. Výběr ligandu ...44 // 1. Povaha a mechanismus interakce ligandu s makromolekulou ...45 // 2. Afinita ligandu k makromolekule ...46 // 3. Způsob připojení ...47 // a) Chorismátmutasa ...51 // b) Penicilinasa ...52 // 4. Koncentrace ligandu ...53 // D. Další poznámky k přípravě afinitních adsorbentů ...56 // E. Faktory ovlivňující adsorpci proteinů ...57 // 1. Povaha adsorpční izotermy ...58 // 2. Průtok ...61 // 3. Koncentrace proteinu ...63 // 4. Vliv teploty ...63 // 5. Vsádková adsorpce ...65 // 5 F. Eluce specificky adsorbovaných makromolekul ...65 // 1. Obecná teorie eluce ... 65 // a) Frontální analýza ...65 // b) Vytěsňovací analýza ...66 // c) Eluce zónou vytésňovacího činidla ...68 // d) Eluční analýza ...68 // 2. Eluce specificky adsorbovaných makromolekul ...70 // a) Nespecifické metody eluce ...70 //

b) Speciální metody eluce ...73 // c) Specifické metody eluce ...75 // 3. Účinnost elučních postupů ...83 // G. Kapacita afinitního adsorbentu ...85 // H. Úspěchy afinitni chromatografie ...88 // I. Povaha nespecifických vlivů ... 88 // J. Kritéria afinitni chromatografie ...94 // K. Příklady techniky afinitni chromatografie ...95 // 1. Čištění neuraminidasy z Vibrio cholerae ...96 // 2. Čištění stafylokokové nukleasy afinitni chromatografií na imobilizovaném inhibitoru ...97 // 3. Příprava tří kolagenas obratlovců v čisté formě ...97 // 4. Čištěni rozpustné estradiol-17/í-dehydrogenasy z lidské placenty ...99 // 5. Specifická eluce pyruvátkinasy ze sloupců CM-celulosy allosterickým efektorcm i 00 // Literatura ...101 // III. Skupinově specifické adsorbenty ...105 // A. Afinitni chromatografie na imobilizovaných koenzymech ...107 // 1. Pyridinové koenzymy ...109 // 2. Adeninové nukleotidy ...123 // 3. Jiné nukleotidy ...125 // 4. Flavinové nukleotidy ...128 // 5. Pyridoxalové koenzymy ...131 // 6. Folát a jeho analoga ...135 // 7. Biotin ...141 // 8. Lipoová kyselina ...142 // 9. Kobalaminy ...143 // 10. Hemové koenzymy ...146 // B. Enzymy metabolismu nukleových kyselin ...147 // C. Thiolové enzymy ... 152 // D. Hydrolasy (proteasy) ...154 // Literatura ...165 // IV. Některé aplikace a speciální techniky afinitni chromatografie ... 170 // A. Čištění regulačních makromolekul a komplexních biologických struktur ...170 // 6 1. Protilátky a antigeny ...171 //

2. Vazebné a transportní proteiny ...176 // 3. Receptorové proteiny ...180 // 4. Buňky a viry ...‘ ...186 // 5. Afinitní změna hustoty ...187 // 6. Konkanavalin A a glykoproteiny ...189 // 7. Použití v molekulární biologii ...193 // B. Analytická použití ...196 // 1. Oddělování chemicky modifikovaných enzymů ...197 // 2. Čištění afinitně značených peptidů z aktivního místa proteinu ...198 // 3. Čištění komplementárních a syntetických peptidů a proteinů ...200 // 4. Výzkum mechanismů enzymových reakcí ...201 // 5. Použití v biochemii nukleových kyselin ...208 // C. Speciální techniky ...211 // 1. Hydrofobní afinitní chromatografie ...211 // 2. Kovalentni afinitní chromatografie ...214 // Literatura ...216 // V. Chemie afinitní chromatografie ...223 // A. Nosičové matrice ...224 // 1. Celulosa ...224 // 2. Dextranové gely ...224 // 3. Agarosa ...225 // 4. Polyakrylamidové gely ... 227 // 5. Sklo ...228 // 6. Jiné nosiče ...229 // B. Aktivace a zavádění funkčních skupin do matric ...229 // 1. Polysacharidové matrice ...229 // a) Halogenkyany ...229 // b) Triaziny ...236 // c) Oxidace jodistanem ...237 // d) Epoxidy ...238 // e) Činidla se dvěma funkčními skupinami ...238 // f) Jiné metody ...239 // 2. Polyakrylamid ...240 // 3. Pórovité sklo ...242 // 4. Jiné nosičové matrice ...242 // C. Oddalující články ...243 // D. Příprava adsorbentů o velké kapacitě ...246 // E. Způsoby připojení ligandů k oddalujícím článkům ...247 //

1. Karbodiimidová kondenzace ...247 // 2. Jiné metody syntézy peptidové vazby ...250 // 3. Reakce sukcinanhydridu ...250 // 7 4. Reakce N-substituovaného hydroxysukcinimidu ...251 // 5. Obecná acylazidová metoda ...253 // 6. Diazotačni postupy ... 254 // 7. Redukční alkylace ...256 // 8. Isothiokyanátové připojení ... 258 // 9. Činidla se dvěma funkčními skupinami ... 258 // a) Deriváty maleinimidu ... 259 // b) Alkylhalogenidy ... 259 // c) Arylhalogenidy ... 262 // d) Isokyanáty ... 263 // e) Acylační činidla ... ЗбЗ // f) Imidoestery ... 263 // g) Dialdehydy ... 264 // h) Vinylsulfony ... 264 // 10. Thiolační reakce ...264 // F. Funkční skupiny ligandu ... 266 // G. Metody stanovení množství imobilizovaného Ugandu ... 267 // 1. Diferenční analýza ...267 // 2. Přímá spektroskopie ... 267 // 3. Rozpouštění gelů ... 273 // 4. Kyselá nebo enzymová hydrolýza ... 274 // 5. Elementární analýza ... 275 // 6. Neutralizační titrace ... 275 // 7. Radioaktivita ... 275 // 8. Speciální metody stanovení thiolových skupin ... 276 // H. Laboratorní techniky ... 277 // 1. Promývání a uchovávání agarosy ... 277 // 2. Aktivace agarosy bromkyanem ... 277 // 3. Příprava (o-aminoalkylagarosy ... 280 // 4. Barevná zkouška s natrium-2,4,6-trinitrobenzensulfonátem ... 280 // 5. Připojení ligandu pomocí karbodiimidu rozpustného ve vodě ... 281 // 6. Příprava derivátů pro připojení ligandu pomocí azoskupiny ... 281 // 7. Chromatografie ...282 // Literatura ... 282 // Rejstřík ... 287

cnb000135816