.

0 (hodnocen0 x )

BK

Praha : Academia, 1974

180 s.

000063648

Předmluva 11 // Úvod 13 // Všeobecná část (A. ROMANOVSKÝ) 15 // A. Technické vybavení 15 // 1. Místnost 15 // 2. Optika 15 // 3. Laboratorní sklo 16 // 4. Nástroje 16 // 5. Různé 16 // 6. Větší přístroje 17 // 7. Nástroje vlastní výroby 17 // B. Biologická čistota, sterilita 20 // 1. Mytí a čistení 20 // 2. Sterilisace 21 // 3. Použití antiseptík a antibiotik 22 // C. Operační a kultivační roztoky 23 // D. Narkotisace 26 // E. Cytologické a histologické metody zpracování zárodečného materiálu 27 // F. Obojživelníci, jejich chov a vývoj 31 // 1. Používané druhy obojživelníků 31 // 2. Přechovávání a chov 34 // 3. Péče o vajíčka, zárodky a larvy 35 // 4. Krmení 36 // 5. Nemoci obojživelníků 36 // 6. Vývojová stadia, rychlost vývoje, motilità 37 // a) Vývojová stadia 37 // b) Rychlost vývoje 39 // c) Motilità 39 // G. Všeobecné pokyny к pokusné práci 41 // 1. Příprava pracovního prostoru 41 // 2. Příprava operačních misek 41 3. Příprava kultivačních misek 41 // 4. Příprava nástrojů к operaci 42 // 5. Příprava zárodků к operaci 43 // 6. Používání roztoků 43 // 7. Zacházení s operovanými zárodky a jejich další kultivace 44 // 8. Vedení protokolu 44 // H. Některé speciální metody a návody 45 // 1. Vynucená ovulace a umělé oplození 45 // a) Vynucená ovulace 45 // A nur a 45 // Urodela 47 // b) Umělé oplození 48 // Anura 48 // Urodela 49 // 2. Odstranění vaječných obalů 50 // a) Odstranění vnějších obalů 50 // Mechanické odstranění 50 // Odstranění obalů trávením papainem 52 // Odstranění obalů včetně vitelinní // membrány trávením trypsinem a papainem 52 // Odstranění obalů a vitelinní membrány trypsinem a thioglykolátem // Odstranění obalů ozářením ultrafialovým světlem 53 //

Získání vajíček bez vnějších obalů podvázáním vejcovodu 54 // b) Odstranění vitelinní membrány 54 // 3. Barvení chromosomů v ocasních špičkách larev a roztlacích zárodků 55 // a) Metoda barvení ocasních špiček 55 // b) Barvení chromosomů v roztlacích a nátěrech 57 // Experimentální výzkum přípravných a počátečních fází vývoje 59 // A. Samčí pohlavní ústrojí a spermatogenese (J. NEDVÍDEK) 59 // 1. Varle 59 // 2. Spermatogenese 60 // 3. Výdej spermií 61 // 4. Přídatné orgány 61 // B. Samičí pohlavní ústrojí a oogenese (J. NEDVÍDEK) 61 // 1. Vaječník 61 // 2. Oogenese 62 // a) Příprava mikroskopických preparátů ovaria 64 // b) Operační vynětí části ovaria a kultivace oocytů 65 // c) Třídění oocytů 65 // d) Odstranění folikulárních buněk 66 // e) Injekce do oocytů a vajíček 67 // f) Isolace jádra oocytů 67 // g) Isolace chromosomů 68 // h) Trvalé preparáty chromosomů 70 // i) Značení chromosomů radioaktivními prekursory 71 // 3. Zrání oocytů a ovulace 72 a) Indukce zrání in vitro 74 // b) Indukce zrání a ovulace in vitro 74 // 4. Zvrat pohlaví 74 // C. Oplození a zygota (A. ROMANOVSKÝ) 76 // 1. Oplození 76 // a) Časový sled změn jaderného materiálu v oplozeném vajíčku (cytologie oplození) a jejich // závislost na teplotě 79 // b) Aktivace neoplozenvch vajíček elektrickým šokem 79 // c) Aktivace neoplozenvch vajíček skokana nabodnutím 79 // 2. Umělá parthenogenese 81 // a) Parthenogenetický vývoj vajíček skokana po nabodnutí 81 // 3. Androgenese 82 // a) Enukleace vajíčka odstraněním dělícího vřeténka nabodnutím 82 // b) Enukleace vajíčka čolka odsátím dělícího vřeténka 82 // c) Enukleace vajíček UV ozářením 83 // 4. Gynogenese 83 // a) Inaktivace spermií skokana působením toluidinové modři 84 //

b) Inaktivace spermií čolka UV ozářením 84 // 5. Hybridisace 84 // a) Hybridisace čolků 85 // 6. Heteroploidie 86 // a) Produkce heteroploidů teplotním šokem aplikovaným na vajíčko těsně po oplození 87 // b) Produkce tetraploidů tepelným šokem aplikovaným v období 1. rýhy 87 // 7. Transplantace jader 88 // a) Vnitrodruhová transplantace jader u skokana 89 // b) Mezidruhová transplantace jader u čolka 90 // III. Experimentální výzkum období rýhování, morfogenese a organogenese (A. ROMANOVSKÝ) 93 // A. Rýhování, blastula 93 // a) Produkce identických dvojčat konstrikcí zárodku ve stadiu dvou blastomer 94 // B. Gastrula, neurula, pokročilá stadia 95 // 1. Exstirpace, implantace, transplantace 98 a) Exstirpace části neurální destičky 98 // b) Exstirpace poloviny neurální destičky a její replantace při obrácení její podélné a příčné osy 99 // c) Implantace horního rtu blastoporu do blastocoelu časné gastruly (indukce sekundární // neurální destičky) 100 // d) Transplantace základu končetiny 101 // e) Parabiosa 102 // f) Chiméry 103 // 2. Kultivace isolovaných tkání či orgánových základů 104 // a) Kultivace explantované tkáně v ektodermálním váčku (sendvič technika) 105 // b) Kultivace zárodečného ektoblastu ve visuté kapce 106 // 3. Kultivace zárodečných buněk (buněčná kultura) 107 // a) Kultivace isolovaných buněk časného zárodku 108 // 4. Disociace zárodečných tkání a separace buněk 111 // 7 IV. Imunoembryologie (A. ROMANOVSKÝ) 113 // A. Základní potřeby 114 // 1. Materiál 114 // 2. Roztoky 114 // B. Příprava antigenních extraktů, imunisace, příprava sér 115 // 1. Příprava antigénu a imunisace 115 // 2. Odběr krve, zpracování a uložení sér 117 // 3. Příprava testovacích antigénu 118 // 4. Vysycování antisér 118 //

5. Příprava globulinové frakce antiséra 119 // C. Prsténcová precipitační reakce 120 // D. Precipitace v agarovém gelu (agaroprecipitace) 121 // 1. Jednoduchá difuse podle Oudina 122 // 2. Dvojitá difuse v kapiláře 124 // 3. Dvojitá difuse v misce podle Ouchterlonyho 124 // E. Imunoelektroforesa 130 // F. Imunofluorescence 132 // a) Průkaz ztráty antigenní specifity vajíčka v dalším vývoji zárodku prsténcovou reakcí 136 // b) Průkaz stadijně specifické antigenicity neuruly dvojitou difusí v agaru modifikací podle // Abeleva 137 // c) Průkaz orgánově specifických antigenů svalu imunoelektroforesou 138 // d) Průkaz přítomnosti myosinu v myotomu zárodku skokana imunofluorescencí 138 // G. Transplantační imunita u obojživelníků 138 // 1. Všeobecné pokyny 139 // 2. Transplantace kůže na pulcích skokanů 140 // 3. Transplantace kůže na dospělých skokanech 140 // 4. Transplantace hůže na čolcích 141 // 5. Aktivně získaná tolerance u obojživelníků 142 // a) Vyvolaní tolerance injekcí homogenátu heterologní tkáně v larválním stádiu 142 // b) Vyvolání tolerance embryonální parabiosou 142 // c) Závislost vyvolání tolerance na kvantitě transplantovaného materiálu v zárodečném // období 143 // V. Chemická embryológie (J. NEDVÍDEK) 144 // A. Cytochemické metody 145 // 1. Barevné reakce 145 // a) Feulgenova reakce 145 // b) Barvení methylovou zelení a pyroninem 146 // c) Barvení nukleolárního organisátoru 147 // 2. Fluorescenční mikroskopie 147 // a) Schiffovo reagens - auramin O 147 // b) Barvení akridinovou oranží 148 // 8 3. Enzymatická extrakce 148 // a) Extrakce desoxyribonukleasou 149 // b) Extrakce ribonukleasou 149 // 4. Hybridisace nukleových kyselin in situ 149 // В. Biochemické metody 151 // 1. Radioaktivně značené prekursory 151 //

a) Dlouhodobé značení RNK oocytů 152 // b) Pulsní značení RNK 152 // c) Značení nukleových kyselin v době zrání a ovulace 153 // d) Značení nukleových kyselin v zárodečném vývoji 153 // e) Značení RNK in vitro 153 // 2. Příprava a uchovávání materiálu 154 // a) Odstranění bakterií 154 // b) Odstranění folikulárních buněk 154 // c) Skladování vajíček a zárodků 155 // 3. Kvantitativní stanovení nukleových kyselin 155 // a) Metody extrakce 155 // b) Kolorimetrické stanovení 158 // 4. Isolace žloutkových zrn a mitochondrii 160 // 5. Isolace nukleových kyselin 160 // a) Isolace DNK podle Marmura 161 // b) Isolace DNK ze žloutku 162 // c) Isolace RNK 162 // 6. Dělení nukleových kyselin 164 // 7. Dělení basí a nukleotidů 164 // a) Chromatografie na papíře 164 // b) Chromatografie na tenké vrstvě celulosy 165 // c) Dělení nukleotidů sloupcovou chromatografií 166 // 8. Isolace bílkovin 166 // a) Isolace aktinu 166 // b) Isolace myosinu 167 // Doslov 168 // Literatura 169 // Rejstřík 177 // Přílohy

(OCoLC)42103428

cnb000464760